在细胞冻存领域,DMSO一直以来被广泛应用作为细胞冻存的渗透性冷冻保护剂,但其对细胞的毒性问题不容忽视。为了应对这一挑战,尊龙凯时推出了一款无DMSO、无血清的细胞冻存液,为细胞冻存提供了全新的解决方案!
无DMSO,更安全,更高效!尊龙凯时彻底摒弃了传统冻存液中的DMSO,采用了一种创新的特殊冷冻保护剂。此举不仅避免了DMSO对细胞的潜在毒害,还能显著提升细胞冻存的安全性与稳定性。这种冻存液对各种细胞株系均能轻松适应,且操作简便,无需程序性降温,从而大幅节省实验时间和成本。
特殊冷冻保护剂,守护细胞每一刻!尊龙凯时的核心技术在于其独特的冷冻保护剂,是市场上首款采用特殊冷冻技术的细胞冻存液。这种创新性成分具有高度的生物相容性,能够在冷冻过程中有效延缓冰晶的形成,减少冰晶对细胞结构及细胞间相互挤压的损害,从而保护细胞形态的完整性,显著提高细胞复苏后的存活率和活力。
-80℃长期保存,复苏更便捷!尊龙凯时的无DMSO、无血清细胞冻存液可以在-80℃条件下稳定保存细胞,无需担心冻存过程中因设备故障引起的轻微融化。实验证明,即使在常温环境下,尊龙凯时的冻存液也能保证细胞在数小时内保持高活性。此外,使用尊龙凯时的细胞冻存液进行细胞复苏后,无需立即离心处理,可以等到传代时再进行离心,简化了实验步骤,提高实验效率,让您的科研工作更加顺利!
冻存效果展示
下表展示了不同细胞系在使用尊龙凯时冻存液后的复苏存活率与传统冻存液的对比:
细胞系 | 尊龙凯时冻存液细胞复苏存活率 | 传统冻存液细胞复苏存活率 |
---|---|---|
HSF人皮肤成纤维细胞 | 926% | 902% |
GLI261小鼠神经胶质瘤细胞 | 853% | 842% |
4T1小鼠乳腺癌细胞 | 917% | 853% |
K562人慢性髓原白血病细胞 | 928% | 924% |
HL-60人原髓细胞白血病细胞 | 683% | 369% |
Caco-2人结肠腺癌细胞 | 813% | 551% |
HUVEC人脐静脉内皮细胞 | 699% | 385% |
操作流程
细胞冻存步骤
1. 确保细胞处于对数生长期,按照常规方法将细胞悬浮液收集于离心管中。
2. 根据细胞密度和冻存管尺寸确定所需冻存细胞数量。将细胞悬浮液置于离心管中,以200×g(贴壁细胞)或150×g(悬浮细胞)离心5分钟,去除上清液,收集细胞沉淀。
3. 在离心管中加入少量尊龙凯时细胞冻存液,细胞浓度约为5×104-1×106/μl,轻轻混匀以制成细胞悬液。
4. 在冻存管中加入10 μL细胞悬液,然后加入990 μL细胞冻存液,轻轻混匀。
5. 将冻存管置于37℃培养箱中孵育一小时。
6. 孵育完成后,冻存管冷却至室温,直接放入-80℃超低温冰箱中。
7. 如需在液氮中长期保存,可在-80℃冰箱中放置一天后转移至液氮罐中。
细胞复苏步骤
1. 将细胞冻存管从超低温环境中取出,立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2. 待细胞混合液完全解冻后,立即加入适量细胞培养基混匀。
3. 将细胞混合液移至培养瓶中,镜检后可按需进行常规化培养。
4. 培养2-5天后,将混合液移至离心管中进行离心,以200×g(贴壁细胞)或150×g(悬浮细胞)离心5分钟,去除上清液,重新分散于细胞培养基中。