靶向蛋白质降解（TPD）是通过诱导E3泛素连接酶与靶向蛋白质相互接近，从而促进靶向泛素化及后续的蛋白酶体降解。这一新兴的治疗工具在处理致病蛋白方面展现出巨大的潜力。目前，TPD主要通过两种方式实现：第一种是使用蛋白质降解-靶向嵌合体（PROTACs），这是一种由两个独立部分组成的双功能化合物，分别与靶点和E3连接酶结合；第二种是利用单价结合连接酶或靶点的分子胶。

在本文中，我们将重点讨论一种新型BRD4双功能降解剂，称为分子内双价粘合剂（Intramolecular Bivalent Glues，IBGs），其为靶向蛋白质降解引入了一种全新的模式。与PROTACs不同，IBGs以cis构象同时连接靶蛋白的两个相邻结构域，从而增强与E3连接酶的表面互补性。这种构象变化利用了靶蛋白与连接酶之间的天然亲和力，将BRD4“粘”在E3连接酶DCAF16上，促使BRD4降解，而在没有这种化合物的情况下，降解是不会发生的。

通过对BRD4–IBG1–DCAF16三元复合物的结构解析，为更高效降解剂的理性设计提供了参考，使其效力达到了低皮摩尔级别。使用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）分析法，我们评估了BRD4与DCAF16的三元复合物形成。这一分析使用了针对BRD4的铕标记抗体与Cy5标记的DCAF16。

实验结果表明，如果IBG分子诱导标记的BRD4与DCAF16之间形成三元复合物，则荧光团之间的距离足够近，可以形成荧光共振能量转移（FRET）。通过TR-FRET液体分析中的各类实验，我们得到了关于IBGs在促进BRD4与DCAF16结合及形成复合物方面的证据。

在评估双价分子胶的特性时，研究发现IBG1与DCAF16、BRD4 Tandem之间形成稳定的三元复合物。这一点得到了TR-FRET复合物形成分析及稳定性分析的支持，结果显示IBG1的活性优于其单价前体JQ1。此外，IBG3作为新合成的化合物，在降解BRD4方面表现出更高的效率，进一步验证了双价分子胶的增强特性。

通过IBG1和IBG3的作用机制研究，研究人员发现这些分子内双价胶能显著增强BRD4与DCAF16之间的亲和力，并形成新的分子关联模式。强效的分子内部粘合作用为靶向多种效应蛋白、重构细胞信号通路提供了新的潜在路径。

综上所述，通过本文所描述的TR-FRET相互作用分析，我们展示了一种新型分子胶的特性。基于此，尊龙凯时致力于推动生物医疗领域的研究与应用，为靶向蛋白质降解的药理研究开辟了广阔的发展前景。我们期待这样的策略能够在未来的药物开发中发挥更大的作用。